<th id="q8btx"></th>
<tbody id="q8btx"><noscript id="q8btx"></noscript></tbody>
      <th id="q8btx"><track id="q8btx"><rt id="q8btx"></rt></track></th>
      <progress id="q8btx"></progress>
      <button id="q8btx"><acronym id="q8btx"><cite id="q8btx"></cite></acronym></button>
      <tbody id="q8btx"><track id="q8btx"></track></tbody>
      搜索
      搜索

      科技成就健康生活

      產品
      /
      /
      /
      /
      HiScript II Q Select RT SuperMix for qPCR(+gDNA wiper)

      科學研究試劑

      高通量測序文庫構建試劑

      藥物研發試劑

      • R233-說明書-V21.1.pdf

        大?。?/span>
        2021-04-09 17:19:17
      1/1
      瀏覽量:
      5377

      HiScript II Q Select RT SuperMix for qPCR(+gDNA wiper)

      HiScript?IIQSelectRTSuperMixforqPCR(+gDNAwiper)?可靈活選擇逆轉錄引物的兩步法RT-qPCR首選預混液(去基因組)?·基于高效的HiScript?IIReverseTranscriptase·針對不同實驗設計可靈活使用不同類型的逆轉錄引物?·gDNAwiperMix可迅速徹底去除基因組污染??本產品以高性價比的HiScript?IIReverseTra
      價格:
      1350.0
      市場價
      1350.0
      瀏覽量:
      5377
      貨號:
      R233-01
      數量:
      -
      +
      庫存:
      9999
      暫時無貨
      1
      產品詳情
      FAQ
      組分
      說明書

      HiScript® II Q Select RT SuperMix for qPCR(+gDNA wiper)

      可靈活選擇逆轉錄引物的兩步法 RT-qPCR 首選預混液(去基因組)

      基于高效的HiScript® II Reverse Transcriptase

      針對不同實驗設計可靈活使用不同類型的逆轉錄引物

      gDNA wiper Mix 可迅速徹底去除基因組污染

      本產品以高性價比的HiScript® II Reverse Transcriptase為基礎,使用設計獨特的Oligo(dT) 23  VN 引物,提高了反應特異性及靈敏度,獲得質量更好的cDNA。針對不同實驗設計可靈活使用不同類型的逆轉錄引物,滿足多樣化的實驗需求,可根據逆轉錄后續實驗需要選擇Oligo (dT) 23  VN primer/Random Hexamers 或基因特異性引物(GSP)。同時對反應體系進行大幅簡化,5 × qRT SuperMix 含有反轉錄反應除引物以外所需的全部試劑且在-20℃不會凍結,使用方便。試劑盒中的4 × gDNA wiper Mix 可徹底去除殘留的基因組DNA 污染,保證后續定量結果更加可靠。逆轉錄得到的產物可用于SYBR Green qPCR分析法和探針分析法,進行高性能的基因表達分析。

      組分

      R233-01 100 rxn (20 μl/rxn)

      RNase free ddH2O

      2×1 ml

      4 × gDNA wiper Mix

      400 μl

      5 × HiScript® II Select qRT SuperMix II a

      400 μl

      Oligo (dT)23 VN  (10 μM)

      100 μl

      Random hexamers (50 ng/μl)

      100 μl

      5 ×Select No RT Control Mix b

      40 μl

      a. 包含Buffer、dNTP Mix、HiScript® II Reverse Transcriptase、RNase inhibitor。

       注意:與HiScript® II Q Select RT SuperMix for qPCR (R232-01)中所帶的5 ×HiScript® II Q Select qRT SuperMix成分不同,不可以混用。

      b. 除不含HiScript® II Reverse Transcriptase外,其余成分與5 × HiScript® II Select qRT SuperMix II相同,用于配制No RT對照反應。

      -30 ~ -15℃保存。

      關鍵詞:
      R233-01
      可靈活選擇逆轉錄引物的兩步法RT-qPCR首選預混液(去基因組)
      未找到相應參數組,請于后臺屬性模板中添加

      Q1:原核生物RNA能用我們的逆轉錄試劑嗎?

      A1:可以。原核生物RNA沒有polyA尾,所以在逆轉錄反應體系中需要以Random primer作為逆轉錄引物。

      Q2:逆轉錄試劑盒中帶有gDNA wiper Mix,可以去除殘留在RNA中的基因組。最多可以去除多少的基因組?但如果不進行基因組去除,會影響接下來的逆轉錄嗎?

      A2:我們做過100ng基因組的測試,去除效率是99.95%。如果不進行基因組去除不會影響逆轉錄實驗的進行,但是如果基因組殘留嚴重但不去除的話,會影響接下來定量實驗的準確性。

      Q3:延長逆轉錄時間,是否可以提高逆轉錄效率?

      A3:對于大多數基因,延長逆轉錄時間對逆轉錄效率并沒有顯著提升;對于一些GC含量較高或含高級結構的模板,延長逆轉錄時間可提升逆轉錄效率。

      Q4:做了No RT Control發現有gDNA殘留怎么辦?

      A4:如果使用試劑盒中的gDNA wiper模塊進行gDNA去除,但No RT Control仍有CT值,可通過實驗組和No RT Control組的CT值來判斷實驗數據是否可用。當實驗組CT值與No RT Control對照組CT值差值大于5,說明由gDNA導致的誤差小于5%,則可以忽略gDNA污染;若實驗組與對照組CT值差值小于3或者幾乎一致,則實驗組擴增產物的模板很大一部分來源于gDNA,這樣的實驗組就失去定量意義。

      Q5:如何評判RNA質量?

      A5:RNA質量從兩個方面反應:

      (1) RNA完整度。通過瓊脂糖凝膠電泳驗證RNA完整度。以真核生物為例,完整的總RNA有清晰的三條帶,分子量從大到小分別為28S、18S、5S,并且28S是18S亮度的兩倍;若能看見三條帶,但帶型模糊或彌散,則說明RNA有部分降解,此時請立即進行逆轉錄反應,并適量加大模板量;若只能看見分子量很小的一條帶或沒有條帶,則 RNA 已完全降解,需要重新提取。

      (2) RNA的純度。RNA的純度可以通過OD260/280和OD260/230兩個比值是否在1.8-2.1范圍內進行判斷,蛋白、離子等殘留會使比值降低。

      Q6:如何選擇逆轉錄的引物?

      A6:根據實驗的具體情況選擇隨機引物、Oligo dT或基因特異性引物進行逆轉錄。

      (1) 隨機引物:隨機結合在RNA的任何區域,適用于rRNA、mRNA、tRNA等所有RNA類型的逆轉錄反應。

      (2) Oligo dT:適用于具有PolyA尾的RNA(原核生物RNA、真核生物的rRNA和tRNA不具有PolyA尾)。 由于Oligo dT結合在PolyA尾上,所以對 RNA 樣品的質量要求較高,即使有少量的降解也會使全長cDNA合成量大大減少。

      (3) 基因特異性引物:與模板序列互補,適用于序列已知的基因逆轉錄。

      cDNA后續進行PCR擴增長片段,一般用Oligo dT或者基因特異性引物,不建議使用隨機引物,因為隨機引物是隨機結合的,cDNA片段會偏短,可能會對長片段擴增造成稀釋,后續擴增不出全長的目的基因;cDNA后續進行qPCR,一般使用Oligo dT和隨機引物的混合物,可以避免3’端和5’端的擴增偏好性。

      Q7:可以通過測逆轉產物cDNA濃度判定逆轉效率嗎?

      A7:不可以,逆轉錄產物cDNA是混合物,除了cDNA產物以外,還有buffer、逆轉錄酶、引物,同時還包含未轉錄的模板RNA,總RNA中的tRNA、rRNA等,都會干擾濃度測定結果,因此不能反應真實的cDNA產量。

      這是描述信息
      暫時沒有內容信息顯示
      請先在網站后臺添加數據記錄。

      友情鏈接  諾唯贊醫療 | 諾唯贊海外 | OA系統 | HR系統

      品牌故事  Phanta | ClonExpress | Mut Express microRNA

      產品
      產品
      產品
      產品

      售后服務  服務流程  |  訂購流程  |  真偽查詢

      郵 箱     sales@vazyme.com (銷售咨詢)
            
      support@vazyme.com (技術支持)
           
      marketing@vazyme.com (市場推廣)

      微信公眾號

      掃碼關注

       地 址:江蘇省南京經濟技術開發區科創路紅楓科技園C2棟   電話:400-600-9335  網站建設:中企動力 南京

      搜索
      搜索