<th id="q8btx"></th>
<tbody id="q8btx"><noscript id="q8btx"></noscript></tbody>
      <th id="q8btx"><track id="q8btx"><rt id="q8btx"></rt></track></th>
      <progress id="q8btx"></progress>
      <button id="q8btx"><acronym id="q8btx"><cite id="q8btx"></cite></acronym></button>
      <tbody id="q8btx"><track id="q8btx"></track></tbody>
      搜索
      搜索

      科技成就健康生活

      產品
      /
      /
      /
      /
      2 × Taq Master Mix for PAGE

      科學研究試劑

      高通量測序文庫構建試劑

      藥物研發試劑

      • P113-說明書-V21.1.pdf

        大?。?/span>
        2021-04-09 16:57:53
      1/1
      瀏覽量:
      2613

      2 × Taq Master Mix for PAGE

      2×TaqMasterMixforPAGE???產物適合于聚丙烯酰胺凝膠電泳的DNA聚合酶?優化的緩沖體系,便于快速得到理想的擴增結果提供即用型的預混液,最大程度地減少實驗步驟???本產品由克隆有ThermusaquaticusDNAPolymerase基因的大腸桿菌表達并經過多步純化精制得到,不含核酸內切酶、核酸外切酶以及細菌DNA。TaqDNAPolymerase具有5’→3’外切酶活性,但無
      價格:
      210.0
      市場價
      0.0
      瀏覽量:
      2613
      貨號:
      P113-01/02/03
      所屬分類
      普通PCR
      數量:
      -
      +
      庫存:
      89990
      暫時無貨
      1
      產品詳情
      FAQ
      組分
      說明書

       2 × Taq Master Mix for PAGE

      產物適合于聚丙烯酰胺凝膠電泳的DNA聚合酶

      優化的緩沖體系,便于快速得到理想的擴增結果

      即用型的預混液,最大程度地減少實驗步驟

      本產品由克隆有 Thermus aquaticus DNA Polymerase 基因的大腸桿菌表達并經過多步純化精制得到,不含核酸內切酶、核酸外切酶以及細菌DNA。Taq DNA Polymerase 具有5’ → 3’ 聚合酶活性和5’ → 3’ 外切酶活性,但無3’ → 5’ 外切酶活性。PCR 產物的3’ 端帶A,可克隆至T載體,并適用于ClonExpress® 快速克隆試劑盒(C112/C113/C115/C601)。本產品附帶的10 × Taq Buffer 經過特殊優化,PCR產物適合于聚丙烯酰胺凝膠電泳及瓊脂糖凝膠電泳。

      組分 P113-01 P113-02 P113-03
      2 × Taq Master Mix for PAGE 5 × 1 ml 15 × 1 ml 50 × 1 ml

      -20℃保存。

       

      關鍵詞:
      P113
      產物適合于聚丙烯酰胺凝膠電泳的DNA聚合酶
      未找到相應參數組,請于后臺屬性模板中添加

      Q1:擴增效率低,實驗組無擴增條帶。

      A1:(1) 引物

      檢查人工合成的引物是否因存儲條件不當而降解;引物設計是否合理,可利用BLAST檢查引物特異性或重新設計引物。

      (2) 模板

      長期放置、反復凍融會導致模板斷裂、開環或降解,應使用新鮮制備的DNA雙鏈作為模板;模板GC含量過高會導致DNA的雙鏈無法打開,此時加入PCR Enhancer(貨號P021),可以有效降低解鏈溫度;模板的GC含量過低會導致擴增效率較差,可適當延長引物長度或通過梯度PCR摸索合適的反應條件;模板中存在抑制物,特別是甲醛固定及石蠟包埋的組織常含甲酸,會造成DNA脫嘌呤而影響PCR結果,建議稀釋使用或重新制備;若模板為cDNA,要確認逆轉錄所用RNA的純度及完整度。

      (3) 酶

      反應所用的酶因保存或運輸不當而失活,建議更換新酶或用另一來源的酶重新實驗。

      (4) 擴增體系

      反應體系配制錯誤,建議重復實驗。

      (5) 反應程序

      檢查變性溫度是否準確,PCR儀指示溫度與實際溫度是否相符。如果溫度過高,酶在前幾個循環就迅速失活;溫度過低則模板變性不徹底??蓪ν嘶饻囟仍O置梯度,摸索最佳的退火溫度。檢測延伸時間是否充足。

      (6) Mg2+濃度不合適

      Mg2+濃度過低可影響PCR產量甚至使PCR擴增失??;Mg2+濃度過高會降低PCR的特異性,應適當調整Mg2+濃度。

      Q2:擴增的條帶亮度不太亮。

      A2:(1) 引物

      檢查人工合成的引物是否因存儲條件不當而降解。

      (2) 模板

      首先確認模板的質量,長期放置、反復凍融會導致模板斷裂、開環或降解,應使用新鮮制備的DNA雙鏈作為模板;如果模板沒有了,可用首次擴增產物按倍比稀釋后作為模板進行二次擴增。

      (3) 酶

      可適當提高酶的使用量。

      (4) 反應程序

      可嘗試使用Touch Down程序;延長延伸時間,提高循環數。

      Q3:擴增特異性差,非特異性擴增。

      A3:(1) 引物

      引物設計不夠優化。引物與靶序列有非特異性互補或自身聚合成二聚體,可降低引物濃度進行優化,必要時重新設計引物。

      (2) 模板

      模板不純,被污染,需重新制備模板。

      模板降解或過量,通過電泳檢查模板完整性及濃度,必要時重新純化模板。模板的使用量請參考說明書。

      (3) 反應程序

      反應程序不夠優化。如果出現比目的條帶小的雜帶,可通過提高退火溫度,降低循環數調整;如果出現比目的條帶大的雜帶,可縮短延伸時間、降低循環數。

      (4) 酶

      酶量加入過多。Taq系列:50μl體系加2U。

      Q4:空白對照出現擴增產物。

      A4:(1) 引物設計不合理

      擴增序列與非目的擴增序列有同源性,PCR也可以擴增出非靶序列的序列。

      (2) 若擴增產物條帶大小與目的條帶一致,說明有污染

      更換新的Mix、水或引物重復實驗。反應體系在超凈工作臺內配制,減少氣溶膠污染。

      (3) 為了避免靶序列受到整個基因組或大片段的交叉污染,操作時應小心輕柔,防止將靶序列吸入加樣槍內或濺出離心管外。

      (4) 為了避免靶基因受到空氣中小片段核酸污染,可用巢式PCR方法減輕或消除污染。

      這是描述信息
      上一頁
      1

      友情鏈接  諾唯贊醫療 | 諾唯贊海外 | OA系統 | HR系統

      品牌故事  Phanta | ClonExpress | Mut Express microRNA

      產品
      產品
      產品
      產品

      售后服務  服務流程  |  訂購流程  |  真偽查詢

      郵 箱     sales@vazyme.com (銷售咨詢)
            
      support@vazyme.com (技術支持)
           
      marketing@vazyme.com (市場推廣)

      微信公眾號

      掃碼關注

       地 址:江蘇省南京經濟技術開發區科創路紅楓科技園C2棟   電話:400-600-9335  網站建設:中企動力 南京

      搜索
      搜索