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      科學研究試劑

      高通量測序文庫構建試劑

      藥物研發試劑

      • NA201-說明書.pdf

        大?。?/span>
        2020-06-30 00:22:11
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      VAHTS AmpSeq Library Prep Kit V2

      VAHTSTM?AmpSeqLibraryPrepKitV2操作快速簡便:從DNA到文庫擴增低至5h,手工操作時間小于1.5h,中間無純化步驟兼容多類型樣本:可兼容基因組DNA、cfDNA、FFPEDNA極高的on-target比例:比例接近100%優秀的數據均一度:>95%極低的模板起始量:起始DNA模板量低至1ngOne-tube流程簡單,從DNA到文庫擴增低至5h,手工操作時間小于1.5h,
      價格:
      8600.0
      市場價
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      貨號:
      NA201-01/02
      數量:
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      庫存:
      19998
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      產品詳情
      FAQ
      組分
      說明書

      VAHTS® AmpSeq Library Prep Kit V2

      操作快速簡便: 從DNA到文庫擴增低至5 h,手工操作時間小于1.5 h,中間無純化步驟

      兼容多類型樣本: 可兼容基因組DNA、cfDNA、FFPE DNA

      極高的on-target比例: 比例接近100%

      優秀的數據均一度: > 95%

      極低的模板起始量: 起始DNA模板量低至1 ng

         One-tube

      流程簡單,從DNA到文庫擴增低至5 h,手工操作時間小于1.5 h,中間無純化步驟,易于實現自動化。

         兼容多類型樣本

      可兼容基因組DNA、cfDNA、FFPE DNA

         極高的On-target比例

      On-target比例接近100%

      圖1. 不同樣本多次重復實驗的On-target比例

      圖1是配合VAHTS® AmpSeq Cancer HotSpot Panel (Vazyme #NA102) 建庫的下機數據統計結果。由圖可知,無論起始模板是來源于細胞提取的高質量基因組,還是來源于復雜模板如FFPE樣本和cfDNA,On-target比例均接近100%,且多次實驗重復性優秀。

      圖2. 不同測序深度的擴增子On-target比例

      圖2是本試劑盒配合VAHTS® AmpSeq Cancer HotSpot Panel (Vazyme #NA102) 建庫的下機數據統計結果。由圖可知,大于0.2×平均深度的擴增子On-target比例超過95%,大于0.5×平均深度的擴增子On-target比例高于90%。

      •  極低的模板起始量

      起始DNA模板量低至1 ng。

      •  防污染

      末端引物消化技術使得文庫不能再作為下一輪的擴增模板使用

      •  節約成本

      引物序列幾乎不被測序,充分利用上機數據

      •  雙平臺兼容

      兼容Illumina和Ion Torrent測序平臺

      •  卓越的擴增子GC兼容性

      對不同GC含量擴增子均能實現均勻、有效擴增

      圖3. 不同樣本多次重復實驗的On-target比例

      圖3是本試劑盒配合VAHTS® AmpSeq Cancer HotSpot Panel (Vazyme #NA102)建庫的下機數據統計結果。由圖可知,絕大多數GC含量分布在20%-80%的擴增子測序深度均能達到或超過0.2×平均測序深度。

      VAHTS® AmpSeq Library Prep Kit V2是以超多重PCR為基礎,引入末端引物消化等多個核心技術,連接接頭形成文庫的一款擴增子建庫試劑盒。本試劑盒建庫全程在一管內進行,中間無純化步驟,從擴增到生成文庫,時間低至5 h,其中手動操作時間小于1.5 h。本試劑盒起始模板量為1-100 ng,兼容基因組DNA、FFPE樣本、cfDNA等模板。本試劑盒適用于Illumina和Ion Torrent 兩種主流高通量測序平臺,并提供配套接頭(Vazyme #NA110/111系列和Vazyme #NA120/121系列),可適用的Panel包括VAHTS® AmpSeq Cancer HotSpot Panel(Vazyme #NA102)、Ion Ampliseq系列Panel和AmpliSeq for Illumina系列Panel,以及相應個性化定制Panel。

      相比于上一代產品(Vazyme #NA101),本試劑盒在保證擴增子文庫高覆蓋度和高均一度的基礎上,對FFPE、cfDNA等困難樣本兼容性有了極大提高,優化的多重擴增Mix減少了移液操作,建庫結果更加穩定、可靠,幫助研究者和檢測人員簡便、快速、高質量地完成擴增子建庫。試劑盒中提供的所有試劑均經過了嚴格的質量控制和功能驗證,最大程度上保證了文庫構建的穩定性和重復性。

      組分 NA201-01 (24 rxn) NA201-02 (96 rxn)
      5 × VAHTS Multi-PCR Mix 96 μl 384 μl
      VAHTS Digest Mix 2 48 μl 192 μl
      VAHTSLigation Enhancer 144 μl 576 μl
      VAHTSLigation Enzyme Mix 2 24 μl 96 μl
      VAHTS HiFi Amplification Mix 600 μl 4 × 600 μl
      PCR Primer Mix for Ion Torrent 120 μl 480 μl
      PCR Primer Mix for Illumina 120 μl 480 μl
      TE 1 ml 4×1 ml

      -30 ~ -15℃保存??捎?20 ~ 0℃運輸。

      關鍵詞:
      VAHTS AmpSeq Library Prep Kit V2
      NA201-01/02
      未找到相應參數組,請于后臺屬性模板中添加

      Q1:文庫產量偏低

      A1:(1)重新定量投入模板量,確認模板起始量是否正確。若低于下限(1 ng),需提高投入模板量;

      (2)若模板質量較差,可依據說明書適當提高循環數或使用高質量模板;

      (3)請確認每一步體系以及程序是否按照說明書進行,并注意每一步驟中各項操作細節;

      (4)文庫純化磁珠干燥環節,不能時間過長導致磁珠過于干燥。過于干燥也會降低產量;

      (5)進行文庫擴增時,需確保無磁珠殘留,否則可能抑制擴增反應;

      (6)qPCR文庫定量時,請確保循環時間以及循環數正確。

      Q2:文庫產量過高

      A2:(1)模板投入量是否高于100 ng,若高于,可減少模板投入量;

      (2)多重擴增循環數可依據說明書適當降低。

      Q3:文庫均一度偏低

      A3:(1)較短擴增子較少:可適當提高磁珠純化乘數(1.2 × 提高至1.5 ×)。

      (2)較長擴增子較少:原因可能為模板受損嚴重或PCR環節擴增不充分。請使用高質量模板或將PCR環節中退火延伸時間延長。

      (3)AT含量高的擴增子較少:加倍退火延伸時間或將退火溫度由60℃降低至58℃。

      (4)GC含量高的擴增子較少:在PCR環節的前兩個循環中,將退火溫度由60℃提升至62℃。

      Q4:2100檢測有明顯的接頭二聚體特征峰

      A4:(1)可適當降低磁珠純化的乘數;

      (2)適當降低接頭濃度。

       

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      VAHTS DNA Clean Beads
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