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      科學研究試劑

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      • DD4301-說明書.pdf

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        2021-07-23 15:26:09
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      UniversalBenzo Nuclease

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      產品編號
      DD4301- 01/02/03
      所屬分類
      酶原料
      數量
      -
      +
      庫存:
      29997
      1
      產品詳情
      FAQ
      組分
      說明書

      UniversalBenzo Nuclease

      消化不同類型核酸

      圖1

      在20μl體系中,37℃,30 min條件下,分別投入不同類型的核酸樣本各1 μg,通過瓊脂糖凝膠電泳檢測可知,1 U UniversalBenzo Nuclease (250/μl)對不同類型的核酸消化效果均較為優秀。
       

      最適反應溫度

      圖2

      UniversalBenzo Nuclease的最適反應溫度是37℃

       

      最適PH條件

       

      圖3

      UniversalBenzo Nuclease在pH值在8-10之間均能保 持較高的活性

       

      Na+、K+對酶活的影響

       

      圖4

      Na+ 和K+ 對UniversalBenzo Nuclease活性的抑制性較 強,在Na+和K+濃度達到300 mM時,酶活基本全部喪失;

      Na+和K+對酶的抑制作用具有一致的趨勢,推測所有其他一價陽離子都有類似的效果


      Mg2+、Mn2+對酶活的影響

       

      圖5

      1-2 mM Mg2+或Mn2+的濃度對維持UniversalBenzo Nuclease的活性是必不可少,Mg2+是必須的,因為它能使酶達到最佳活性水平; 
      2-10 mM的Mg2+或Mn2+對UniversalBenzo Nuclease活性無抑制

       

      β-ME對酶活的影響

      圖6

      β-ME對UniversalBenzo Nuclease活性沒有影響

       

      PO43-對酶活的影響

       

      圖7

      0-10 mM PO43-對UniversalBenzo Nuclease活性有一些抑制,但在濃度超過80 mM時對活性抑制較為明顯

       

      Trition X-100、Tween-20對酶活的影響

      圖8

      通過將測試物質加入標準活性測定的反應緩沖液中,評價Trition X-100、Tween-20對UniversalBenzo Nuclease活性的影響; 
      當Trition X-100、Tween-20的濃度低于1%時,對UniversalBenzo Nuclease的活性無顯著影響

       

      EDTA對酶活的影響

      圖9

      EDTA濃度為1 mM時,對UniversalBenzo Nuclease的活性有部分抑制作用;當EDTA濃度超過2 mM幾乎完全抑制了UniversalBenzo Nuclease的活性

      本制品UniversalBenzo Nuclease,是一種來源于粘質沙雷氏菌(Serratia marcescens)的非特異性核酸內切酶,并經過基因工程改造。本酶 可降解雙鏈、單鏈、環狀和線性的RNA和DNA,將核酸完全消化成3- 5個堿基長度的5’-單磷酸寡核苷酸。本酶可在廣泛的條件下高效的降 解所有形式的RNA和DNA,因此被廣泛用于去除生物制品中的核酸。 本品利用大腸桿菌(E. coli)大規模發酵表達純化,在GMP環境下制備,不僅可在科學研究中降低細胞上清和細胞裂解液的粘度,提高蛋 白純化效率及功能研究;還可以應用在病毒載體純化、滅活等各類疫苗生產、蛋白和多糖類制藥工業中作為宿主殘留核酸去除試劑,將宿 主殘留核酸降至皮克(pg)級別。

      組分

      DD4301-01

      DD4301-02

      DD4301-03

      UniversalBenzo Nuclease

      10 KU

      25 KU

      50 KU

      -30 ~ -15℃保存,不建議長期2 ~ 8℃儲存,如需要,建議無菌過濾。
      有效期3年,避免反復凍融。 
      -30 ~ -15℃運輸。

       

      未找到相應參數組,請于后臺屬性模板中添加

      Q:UniversalBenzo Nuclease的抑制條件:

      A:本產品可被一定的鹽濃度抑制活性,以抑制50%左右活性為例,>100 mM的一價陽離子(如 Na+、 K+等),>10 mM的二價Ca2+離子, >100 mM 的鹽酸胍(guanidine HCl),> 20 mM 的磷酸鹽(phosphate),> 25 mM 的硫酸銨(ammonium sulfate)等。 此外,螯合劑也可通過螯合體系中的 Mg2+以達到抑制酶活的作用, 通過加入更多的 Mg2+可恢復 BenzoNuclease 的活性(1mM 的 EDTA 可部分抑制 BenzoNuclease 活性, 5mM 的 EDTA 可使其活性喪失約 90%。 1-2 mM Mg2+離子對于此酶活性至關重要。

      組分

      DD4301-01

      DD4301-02

      DD4301-03

      UniversalBenzo Nuclease

      10 KU

      25 KU

      50 KU

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